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二氯甲烷代替氯仿可提取脂肪

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  从食品或生物组织中提取脂肪的传统方法采用氯仿/甲醇混合物作提取溶剂。因方法具有诸多优点而被广泛采用。然而近年发现氯仿有潜在的致癌性,这时我们发现二氯甲烷代替氯仿可提取脂肪
  1、仪器与试剂103型气相层析仪。脂肪酸甲酯标样为色谱纯,其它试剂均为分析纯。
  2、气相色谱条件2mx3mm不锈钢色谱柱,内装10%DECS+2%H;PO./ChromosodbWAWDMCS(0.18~0.25mm),柱温180C;汽化室及检测器温度2609C,流速;氮气40m/min,氢气55mI/min,空气400m/min。
  3、实验方法(1)脂肪的提取和测定方法I:称取粉碎后的样品1g于100mL碘量瓶中,加入5mL氧仿,10mL甲醇,0.05mL20%氯化镁溶液,振摇2min。再加人5mL氯仿,振摇2mino加入适量水,继续振摇0.5min。抽滤,滤液转人250mL分液漏斗中静置分层。收集氯仿相,挥干溶剂后称重,计算脂肪含量。方法I:除用二氧甲烷代替氯仿外,其它同方1。
  (2)脂肪酸分析分别称取方法I和方法II所得脂肪100mg,。采用室温下酯交换反应甲酯化。取适量上层清液做CC分析。纯物对照定性,面积归一化法定量。3结果与讨论
  4、两种溶剂体系脂肪提取结果分别以氯仿/甲醇和二氯甲烷/甲醇为溶剂,从4种肉制品中提取脂肪进行测定。两种溶剂体系对同--样品测得的脂肪含量基本一致。以火腿肠样品为例,氯仿/甲醇体系所测脂肪含量为15.68%,RSD为1.40%;二氣甲烷/甲醇体系所测脂肪含量为15.53%,RSD为1.61%。为了进一步检验两种溶剂体系所得结果的差异性,对实验数据进行了统计处理。显著性水平为0.05时,两体系所测脂肪含量的结果无显著差异。另外还发现,用二氧甲烷/甲醇为溶剂提取脂肪时,分层更迅速,界面更清晰,结果的精密度更好。
  5、两种溶剂体系脂肪酸分析结果将氯仿/甲醇和二氯甲烷/甲醇体系提取所得脂肪分别进行脂肪酸分析,结果表明:两种溶剂体系对同--样品所得脂肪酸组成完全-一致相应脂肪酸的含量也很相近。以清蒸牛肉样品为例:氯仿/甲醇体系脂肪酸分析结果为:豆蔻酸2.66%,棕桐酸30.04%,棕桐油酸5.22%,硬脂酸13.00%,油酸47.83%。二氣甲烷/甲醇体系脂肪酸分析结果为:豆蔻酸3.02%,棕榈酸29.22%,棕榈油酸5.16%,硬脂酸13.88%,油酸47.57%。统计检验结果表明,两种容剂体系所得脂肪酸含量的结果无显著差异。
  使用氧仿和二氧甲烷两种溶剂体系从不同样品中提取脂肪,完全可以用二氯甲烷代替氯仿/甲酵溶剂体系中的氯仿,作为动物性样品中脂肪含量脂肪酸组成及含量测定的提取剂并且具有方便、快速安全、准确的优点。